新生牛血清被廣泛應(yīng)用于疫苗產(chǎn)品等大量生產(chǎn)生物制品領(lǐng)域，而培養(yǎng)干細(xì)胞大部分實驗室仍采用品質(zhì)更高的胎牛血清，其實在培養(yǎng)腸道干細(xì)胞已經(jīng)有實驗室采用新生牛血清嘗試培養(yǎng)，下面我們來看看相關(guān)實驗結(jié)果。

 

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腸道干細(xì)胞位于腸隱窩內(nèi)，在維持腸道屏障結(jié)構(gòu)和功能完整方面扮演著重要角色。用體外培養(yǎng)技術(shù)對腸干細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)，以進(jìn)一步了解其增殖分化機(jī)制，這對治療腸道相關(guān)疾病具有重要意義。而血清品質(zhì)和濃度對原代細(xì)胞貼壁和生長則具有相當(dāng)大的影響。有人曾嘗試采用DMEM加新生牛血清或胎牛血清進(jìn)行腸道干細(xì)胞的原代培養(yǎng)。嘗試的血清濃度分別為 5%、10%、15%及 20%，并且還加入表皮生長因子20ng/ml、胰島素2 g/ml、谷氨酰胺 2 mmol/ml、青霉素及鏈霉素各 100 U/ml。腸干細(xì)胞的鑒定則采用用角蛋白18抗體（腸干細(xì)胞為陽性）以及波形蛋白抗體（腸干細(xì)胞為陰性，間質(zhì)細(xì)胞為陽性）進(jìn)行組化染色和鑒定。

作者對胚胎鼠腸組織進(jìn)行的腸干細(xì)胞的分離和培養(yǎng)。結(jié)果顯示，只有采用10%新生牛血清加DMEM的培養(yǎng)方式效果很好，在培養(yǎng)24～48h后，貼壁生長的細(xì)胞絕大部分為上皮細(xì)胞，上皮樣細(xì)胞呈集落狀生長，這與國外報道的細(xì)胞形

態(tài)基本符合，其雜質(zhì)細(xì)胞卻很少見到。而其他血清加DMEM的培養(yǎng)則鏡下顯示，細(xì)胞含有大量呈梭狀的間質(zhì)細(xì)胞，上皮細(xì)胞所占比例不足 5%。由上可見，采

用含10%新生牛血清的細(xì)胞培養(yǎng)基進(jìn)行腸干細(xì)胞群的構(gòu)建可以獲得較為純化的腸干細(xì)胞群，角蛋白18染色陽性，波形蛋白染色陰性。因此，選擇合適的血清質(zhì)量和濃度對干細(xì)胞的培養(yǎng)有著十分重要的意義。