非發(fā)酵菌是指一群不能發(fā)酵葡萄糖或僅能以氧化形式利用葡萄糖的革蘭氏陰性桿菌。部分非發(fā)酵菌在臨床上具有致病性，為機會致病菌。近年來此類細(xì)菌從住院病人的痰、尿、血液、體液標(biāo)本中的分離率日漸增高。

分類與命名：

主要的非發(fā)酵G-桿菌屬被分成6個科：

假單胞菌科：根據(jù)rRNA-DNA同源性分為5個rRNA群

①rRNAⅠ群/假單胞菌屬；

②rRNAⅡ群/伯克霍爾德菌屬；

③rRNAⅢ群/叢毛單胞菌屬、食酸菌屬；

④rRNAⅣ群/短波毛單胞菌屬；

⑤rRNAⅤ群/窄食單胞菌屬；

⑥其它：鞘氨醇單胞菌屬、希瓦菌屬等

產(chǎn)堿桿菌科：產(chǎn)堿桿菌屬；

黃桿菌科：華麗桿菌屬

莫拉菌科：不動桿菌屬、莫拉菌屬；

甲基球菌科；

根瘤菌科。

非發(fā)酵菌的基本鑒定要求

缺少糖發(fā)酵的證據(jù)，通常是在KIA或TSI培養(yǎng)基中無酸產(chǎn)生，斜面和底部均呈紅色。

氧化酶+（不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌、唐菖蒲伯克菌、淺黃華麗單胞菌、棲稻黃素單胞菌-），但并非所有氧化酶+的G-桿菌都是非發(fā)酵菌。

麥康凱上生長很差或不生長。

動力：多為+，但多為專性需氧，故半固體培養(yǎng)基中不明顯，宜用直接動力觀察或染色法。

重要的鑒定試驗

葡萄糖利用（O/F試驗）：O/F培養(yǎng)基:蛋白胨和糖類的比例為1:5而不同于發(fā)酵菌的1:2。

氧化酶試驗：細(xì)胞色素氧化酶的產(chǎn)生與否鑒別分類    

氧化酶試驗陽性的非發(fā)酵菌主要有：假單胞菌屬、伯克霍爾德菌、無色桿菌屬、希瓦氏菌屬、  黃桿菌屬、莫拉菌屬等。

氧化酶試驗陰性的非發(fā)酵菌主要有：不動桿菌屬、窄食單胞菌等。

（3）動力：半固體培養(yǎng)基:應(yīng)只穿刺培養(yǎng)基頂部4 mm，在培養(yǎng)4-6小時后觀察結(jié)果,24和48小時后再次觀察結(jié)果。更準(zhǔn)確的方法是濕片法和鞭毛染色。

（4）色素形成：非發(fā)酵菌可形成多種色素，有助于菌種的鑒定。

（5）硝酸鹽還原/產(chǎn)氣：將硝酸鹽還原成亞硝酸鹽，進而釋放氮的生化過程。

（6）吲哚試驗：需用含色氨酸豐富的培養(yǎng)基，產(chǎn)吲哚黃桿菌、腦膜敗血黃桿菌、食酸叢毛單胞菌等。

（7）硫化氫：fu bai希瓦菌是非發(fā)酵菌中在KIA和TSI上產(chǎn)硫化氫的菌種。

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KB019是全面的非發(fā)酵菌標(biāo)準(zhǔn)顯色鑒定系統(tǒng)。非發(fā)酵菌屬于革蘭氏陰性，不生芽孢，多分離自臨床樣本。該試劑盒用于尿、胃腸道等臨床標(biāo)本，也可用于實驗室已擁有的菌株鑒定。它包含12種傳統(tǒng)生化試驗和12種糖發(fā)酵試驗，通過微生物代謝反應(yīng)導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色變化。

該試劑盒包含兩個生化試劑卡，可一次性進行多種生理生化實驗，主要包括的實驗有：

鑒定卡1

鑒定卡2

待鑒定菌種應(yīng)先進行分離和純化。可在營養(yǎng)瓊脂（MV001/MV1274）或腦心浸膏瓊脂（MV211）上挑取一個菌落，接種在５ml腦心浸膏肉湯中，35-37℃培養(yǎng)4-6小時，直到在620nm處，接種液濁度≥0.1OD或0.5 McFarland標(biāo)準(zhǔn)。 無菌打開試劑盒，撕掉封條。每孔接種50μl上述菌液。也可用接種環(huán)劃線。35℃-37℃孵育24-48小時后，按說明書操作。

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